在地球46亿年的历史中,微生物存在了至少34亿年,被称为“地球之王”。大多数时间里,人类与微生物能和谐共处,但它们中有一类侵犯人体,并引起感染甚至传染病,这一类微生物被称为病原微生物或者病原体,包括真菌、细菌、支原体、衣原体、病毒等,其中以细菌和病毒的危害性最大。对这些病原微生物的及时鉴定,是临床治疗中至关重要的环节。
通过对病原生物形态结构鉴定,或者对病原微生物进行染色、培养,并在此基础上进行生物学鉴定,以便能够鉴别不同种类的微生物。传统检测方式主要包括涂片镜检、分离培养与生化反应、组织细胞培养;
血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术,常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等;
随着分子生物学的发展,对病原微生物的鉴定也从形态学和生化学深入到了分子学水平,这种检测方法因避免了上述两种方法存在的周期长、操作复杂、灵敏度及特异度受限的问题成为主流的检测技术,其中使用最多的核酸检测技术是荧光定量PCR检测技术,但荧光定量PCR检测技术依靠扩增曲线和Ct值确定结果,易受PCR抑制剂和扩增效率影响,只能相对定量,结果重复性有一定限制;
作为第三代PCR技术-数字PCR通过将荧光定量的反应体系随机分隔成数万个独立的微小反应单元,基于单分子模板PCR扩增,进行核酸拷贝数绝对定量。博瑞生物自主研发的全自动液滴数字PCR仪具有一体化、全自动、全封闭等优点外在病原微生物核酸检测方面还有以下优势:
1)灵敏度高,可达0.01%~0.001%;
2)无需标准品和标准曲线;
3)可实现绝对定量;
4)扩增抑制因子耐受性高;
5)高重复性;
6)可广泛应用于病原微生物快速检测动态监控及用药指导。
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